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對硫磷完全抗原的合成鑒定及其免疫效果

畜牧家禽網  來源:中國農藥網 閱讀數:

  對硫磷為無色無臭的液體,是廣譜性殺蟲劑,具有觸殺、胃毒、熏蒸的作用,但是如果人吸入或食入,會導致中毒,嚴重的會導致死亡。近日,華中農業大學食品科技學院研究人員發表論文,旨在合成免疫原性較強的人工抗原,為制備對硫磷單克隆抗體和建立免疫快速檢測食品中農藥殘留方法奠定基礎。

  研究指出,成功合成2種對硫磷完全抗原,免疫Balb/c小鼠PA-2-BSA組免疫應答效果好于PA-1-BSA組。該文發表在2013年第01期《解放軍預防醫學雜志》上。

  選用2種方法合成羧基化對硫磷:一種以對硫磷為原料,改造硝基一端;另一種以三氯硫磷為原料,改造磷硫鍵一端。EDC法偶聯牛血清白蛋白(BSA)制備免疫原(PA-1-BSA和PA-2-BSA),并分別免疫Balb/c小鼠。間接ELISA測定抗血清效價,競爭ELISA測定檢測靈敏度,比較免疫效果。

  SDS-PAGE電泳表明,2種完全抗原均合成成功;質譜法鑒定免疫原的偶聯比分別為:N(PA-1/BSA)=7.2,N(PA-2/BSA)=15.4;小鼠抗血清經間接ELISA檢測表明,PA-2-BSA組效價明顯高于PA-1-BSA組;間接競爭ELISA檢測表明,PA-2-BSA組半數抑制濃度(IC50)為1μg/ml,明顯優于PA-1-BSA組(IC50為>100μg/ml)。

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